DNA物种鉴定只能先判断生物来源,不能自动证明样本属于某🔍一个具体的人、某一只狗或某一头猪。人、狗和猪的DNA都由相同的四种碱基组成,部分基因区域也具有相似性,因此不能仅凭DNA总📢量、片段长短或普通电泳结果完成可靠判断。
混合DNA样本需要分别检测各物种标记,并结合扩增曲线、重复实验和阴阳性对照进行解释。检测到犬源D🍀NA并不能排除同时存在人源DNA,检测到猪源DNA也不能排除犬源成分;只有在报告明确采用了双物种检测并给出相应结果时,才能判断是否存在混合来源。
猪or狗DNA的鉴别可以使用猪源和犬源特异性PCR,也可以扩增线粒体细胞色素b、12S或16S等具有物种区分度的区域,再通过测序比对判断来源。线粒体DNA在细胞中的拷贝数通常较多,对部分降解样本较实用,但线粒体结果主要适合物种判断,不适合单独完成个体身份确认。
DNA污染排查需要关注采样、开管、提取、扩增和🍀数据分析的每一个环节。低水平阳性如果只出现一次、重复实验不稳定,或阴性对照也出现信号,应优先考虑污染、非特异扩增和试剂问题🎊,而不是直接下结论。