中国青年报
物种特异性PCR适合回答“是不是人、狗或猪”,而STR或SNP分型更适合回答“同一物种内是否可能来自同一个体”。同一份样本可以先做物种筛查,再根据结果选择人类或犬类个体分型,不能把人类ST⭐R试剂盒的结果直接套用于狗或猪。
判断未知样本是否属于人、狗或猪,应先提出物种问题,再提出个体问题。只想知道样本是不是犬类,可以选择犬类物种鉴定;需要判断两只狗是否为同一只,则必须增加犬类个体分型;涉及人与动物混合物,还要要求实验室说明是否检测了混合成分。
物种鉴定关注某一段序列是否符合人、狗或猪的特征。不同物种之间存在共同基因,这是因为它们都属于脊椎动物并共享许多基本生命功能;共同基因并不意味着样本无法区分。检测人员会寻找差异较稳定的片段,通过👍引物扩增、序列读取或数据库比对判断来源。
“人or狗dna与猪or狗dna”中的“or”应理解为“或”,实际可能包含四种比较:人DNA与猪DNA、人DN🔥A与狗DNA、狗DNA与猪DNA,以及狗DNA与✅狗DNA。前三种属于不同物种之间的鉴别,通常可以借助物种特异性基因片段、线粒体DNA或测序结果区分;最后一种属于同一物种内的个体比较,需要使用个体识别位点,不能只看“是不是狗”。
环境样本特别容易出现人为污染。采集人员的皮肤细胞、口腔细胞或衣物纤维都可能带入人类DNA,狗毛、猪肉碎屑和🌺接触过的器具也可能造成动物DNA混入。检测过程中应使用独立采样工具、空白对照和重复扩增,必要时🔮对不同来源样本分区操作。
线粒体DNA的拷贝数通常高于核DNA,因而在降解样本中更容易检出,但线粒体DNA主要反映母系遗传,个体区分能力有限。核DNA更适合进行个体识别,不过核DNA在无毛根毛发、老化骨骼或严重加工样本中可能不足。
未知样本的物种判断通常从提取DNA开始,随后进行目标片段扩增和结果比对。检测流程大致包括样本登记、DNA提取、浓度与完整性评估、PCR扩增、荧光或测序分析、阳性阴性对照检查,以及最终报告解释。