经济日报
混合DNA样本需要分别检测各物种标记,并结合扩增曲线、重复实验和阴阳性对照进行解🚀释。检测到犬源DNA并不能排除同时存在人源DNA,检测到猪源DNA也不能排除犬源成分;只有在报告明确采用了双物种检测并给出相应结果时,才能判断是否存在混合来源。
DNA污染排查需要关注采样、开管、提取、扩增和数据分析的每一个环▶️节。低水平阳性如果只出现一次、重复实验不稳定,或阴性对照也出现信号,应优先考虑污染、非特异扩增和试剂问题,而不是直接下结论。
DNA检测场景决定了报告需要达到的证🎨据强度。日常排查只需回答物种是否存在,食品或饲料鉴别更关注成分来源,司法或争议样本则通常需要完整的样本封存、交接记录、实验质控和可复核的数据。
DNA物种鉴定只能先判断生物来源,不能自动证明样本属于某一个具体的人、某一只狗或某一头猪。人、狗和猪的DNA都由相同的四种碱基组成,部分基因区域也具有相似性,因此不能仅凭DNA总量、片段长短或普通电泳结果完成可靠判断。
人or狗DNA的区分通常采用人源和犬源两组靶标进行平行检测。人源靶标可针对人类特有的核DNA区域,犬源靶标则针对犬类特异性序列🎉;两个结果都为阳性时,应进一步考虑混合🌟样本或交叉污染,而不是简单选一个结果。
猪or狗DNA的鉴别可以使💫用猪源和犬源特异性PCR,也可以扩增线粒体细胞色素b、12S或16S等具有物种区分度的区域,再通过测序比对判断来源。🔥线粒体DNA在细胞中的拷贝数通常较多,对部分降解样本较实用,但线粒体结果主要适合物种判断,不适合单独完成个体身份确认。