广州日报
实时荧光PCR中的Ct值可以在同一套方法、同一批校准条件下辅助判断目标信号强弱,但Ct值本身不☀️能直接代表🔑DNA的准确含量,也不能把不同物种、不同试剂或不同标记的Ct值简单横向比较。
人、狗、猪的DNA在化学组成上都属于DNA,都由腺嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘌呤和鸟嘌呤等碱基构成。提取后得到的DNA溶液通常不能凭颜色、气味、长度或肉眼观察判断物种来源。真正能够区分它们的是DNA序列中的差异。
因此,两个条件同时为阳性,并不💎能直接证明样本里既有人DNA又有猪DNA。只要有狗DNA,两个“或”条件都可能成立。若想知道样本究竟来自人、狗、猪中的哪一种,必须将人、狗、猪作为三个独立检测目标分别判断,不能只看合并后的“人或狗”“猪或狗”结果。
取样环节同样会影响结论。不同样本应分开包装,尽量使用洁净工具并避免反复接触;对于来源不☀️明、数量很少或保存条件较差的样本,检测结果应结合采样记录和实验对照一起判断。
如果目的是弄清“人or狗DNA和猪or狗DNA”所指的真实物种,委托检测时应明确要求分别检测人、狗、⚡猪三个目标,而不是只接受一个合并结论。报告至少应说明以下内容:
人、狗、猪属于不同物种,经过验证的特异性检测一般可以区分。但不同检测方法的引物设计、灵敏度、特异性和交叉反应情况并不完👍全相同,不能只看到“DNA阳性”四个字,就默认已经完成了物种确认。